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液氮保存攻擊菌解決的問(wèn)題
試驗(yàn)表明，將攻擊菌復(fù)蘇、傳代（3~9代）、分裝并保存在液氮中，攻擊菌仍然保持原有的生物學(xué)特性，符合《中華人民共和國(guó)藥典》〔2〕中攻擊菌的LD50為100~1000 /MLD的要求，可用于無(wú)細(xì)胞百日咳效力檢定。且有較好的穩(wěn)定性，該法制備的攻擊菌用于檢定可減少人力、物力并節(jié)省時(shí)間，降低生產(chǎn)成本，提高工作效率，并能使每批的檢定結(jié)果不因攻擊菌的變化而受影響。因同批制備的攻擊菌支間差異不顯著，從而更能準(zhǔn)確地反映制品的真實(shí)效價(jià)結(jié)果。
在攻擊菌制備過(guò)程中，通過(guò)多次反復(fù)試驗(yàn)取得了一些經(jīng)驗(yàn)，現(xiàn)表述如下:
①在制備過(guò)程中攻擊菌的濃度測(cè)定非常重要，制備過(guò)程嚴(yán)格控制不受污染，而且必須純菌檢查合格;
②要注意在放入液氮前，一定要先緩凍，慢速冷卻會(huì)有充分的時(shí)間使細(xì)胞內(nèi)的水分向外滲出達(dá)到平衡，快速冷卻沒(méi)有充分的時(shí)間使細(xì)胞內(nèi)的水分向外滲出、脫水，加速細(xì)胞內(nèi)冰晶增大，使細(xì)胞處于損傷狀態(tài)或潛在的損傷狀態(tài); 液氮罐價(jià)格
③快速加溫融化不會(huì)在解凍過(guò)程中其冰晶損傷細(xì)胞〔3〕，因此解凍時(shí)一般在3分鐘左右為宜。在生產(chǎn)實(shí)踐中需不斷積累經(jīng)驗(yàn)、掌握操作技能，為提高制品質(zhì)量，在攻擊菌的應(yīng)用上尚有待進(jìn)一步改進(jìn)。
